ชุดทดสอบ ELISA แอนติบอดีซิตรูลลิเนตเปปไทด์แบบไซคลิก (CCP)

ชุดทดสอบนี้ใช้ตรวจหาแอนติบอดีเปปไทด์ซิตรูลลิเนตแบบวงแหวน (แอนติบอดี CCP) ในตัวอย่างซีรั่มของมนุษย์โดยใช้หลักการทางอ้อม โดยใช้แอนติเจนเปปไทด์ซิตรูลลิเนตแบบวงแหวนที่บริสุทธิ์เป็นแอนติเจนเคลือบ

กระบวนการทดสอบเริ่มต้นด้วยการเติมตัวอย่างซีรัมลงในหลุมปฏิกิริยาที่เคลือบด้วยแอนติเจนบริสุทธิ์ที่กล่าวถึงข้างต้นแล้ว ตามด้วยระยะฟักตัว ในระหว่างการฟักตัวนี้ หากมีแอนติบอดี CCP อยู่ในตัวอย่าง แอนติบอดีเหล่านี้จะจดจำและจับกับแอนติเจนเปปไทด์ซิทรูลลิเนตแบบวงแหวนที่เคลือบอยู่บนหลุมไมโคร ทำให้เกิดสารประกอบเชิงซ้อนแอนติเจน-แอนติบอดีที่เสถียร เพื่อให้มั่นใจถึงความแม่นยำของขั้นตอนต่อไป ส่วนประกอบที่ไม่จับกันในหลุมปฏิกิริยาจะถูกกำจัดออกผ่านกระบวนการล้าง ซึ่งจะช่วยกำจัดสารรบกวนที่อาจเกิดขึ้นจากสารอื่นๆ ในซีรัม

จากนั้นเติมคอนจูเกตเอนไซม์ลงในหลุมปฏิกิริยา หลังจากการบ่มเพาะครั้งที่สอง คอนจูเกตเอนไซม์เหล่านี้จะจับตัวกับคอมเพล็กซ์แอนติเจน-แอนติบอดีที่มีอยู่แล้วโดยเฉพาะ ก่อให้เกิดคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันขนาดใหญ่ขึ้นซึ่งประกอบด้วยแอนติเจน แอนติบอดี และคอนจูเกตเอนไซม์ เมื่อนำสารละลายซับสเตรต TMB เข้าไปในระบบ เอนไซม์ในคอนจูเกตจะเร่งปฏิกิริยาเคมีกับซับสเตรต TMB ทำให้เกิดการเปลี่ยนสีที่มองเห็นได้ ความเข้มข้นของปฏิกิริยาสีนี้สัมพันธ์โดยตรงกับปริมาณของแอนติบอดี CCP ที่มีอยู่ในตัวอย่างซีรัมดั้งเดิม สุดท้าย เครื่องอ่านไมโครเพลทจะถูกใช้เพื่อวัดค่าการดูดกลืนแสง (ค่า A) ของส่วนผสมปฏิกิริยา การวิเคราะห์ค่าการดูดกลืนแสงนี้ทำให้สามารถระบุระดับแอนติบอดี CCP ในตัวอย่างได้อย่างแม่นยำ ซึ่งเป็นพื้นฐานที่เชื่อถือได้สำหรับการทดสอบทางคลินิกและการวินิจฉัยที่เกี่ยวข้อง